Наиболее характерным цитопатологическим признаком при репродукции некоторых фитовирусов служит возникновение специфических образований, так называемых включений. Это явление легло в основу диагностического метода по внутриклеточным вирусным включениям, дающего возможность достаточно простого (при световой микроскопии) выявления вируса табачной мозаики (ВТМ), вирусов бобовых культур, вируса зеленой крапчатой мозаики огурца (ВЗКМО) и др. Метод включений может быть также применен для обнаружения заболеваний в латентной форме, при дифференциальной диагностике различных штаммов вирусов (например, ВТМ) и смешанной вирусной инфекции. У некоторых вирусов включения могут быть выявлены только на ультратонких срезах в электронный микроскоп. Описано около 100 фитовирозов, которые можно диагностировать по включениям.
Природа и состав вирусных включений изучены недостаточно. Существуют четыре основных типа внутриклеточных включений:
• кристаллические включения, видимые в световой микроскоп и состоящие в значительной степени из более или менее правильно расположенных вирусных частиц;
• аморфные включения, тоже видимые в световой микроскоп, но помимо вирусных частиц содержащие также некоторые компоненты клетки растения-хозяина;
• включения, состоящие исключительно из клеточных органелл;
• включения, наблюдаемые только под электронным микроскопом и содержащие вирусный структурный белок или не идентифицированный белок, упакованный в виде волокон, трубочек, колесиков [43, 66, 68, 78].
Формы кристаллических включений разнообразны. Нередко один и тот же штамм вируса способен на одном растении образовывать включения различной формы. В качестве примера можно назвать вирус гравировки табака, который образует зернистые включения в цитоплазме и кристаллические - в ядре, штаммы ВТМ, дающие при поражении кристаллы и аморфные образования, и др. (табл. 6). Морфологически Х-тела (аморфные включения) могут быть гомогенными, плотными, без вакуолей (вирусы курчавости верхушки сахарной свеклы, американской мозаики озимой пшеницы) или рыхлыми, содержащими одну или несколько вакуолей (некоторые штаммы ВТМ, вирусы бронзовости томата (ВБТ)). Чаще всего внутриклеточные включения возникают в цитоплазме (изредка в ядрах) в различных тканях и органах растения: листьях, стеблях, корнях, цветках.
Таблица 6
Включения вирусов при световом, их вирионы и фитоплазма при электронном микроскопировании
При изучении фитоплазм в лабораторных исследованиях применяется метод окраски флоэмы растений по Динесу и метод культивирования на искусственных жидких и твёрдых питательных средах, позволяющие содержать коллекции фитоплазм и изучать свойства бактериоцидов и другие вопросы [43, 66, 68, 78].
Источник: Методы диагностики возбудителей заболеваний овощных культур: аналит. обзор. –М.: ФГБНУ «Росинформагротех», 2020. – страница 56-59
